Генетическая экспертиза по установлению близкого родства

Генетическая экспертиза может потребоваться для:

• определения истинного отцовства или материнства детей, если невозможно получить образцы от предполагаемых родителей.
• установления родства для наследственных споров или отказа от наследства.
• оглашения родственных связей для иммиграционных целей.

Чаще всего для генетической экспертизы у предполагаемых родственников берутся образцы буккального эпителия (соскоб с внутренней стороны щеки), кровь из пальца (0,3-0,5 мл), образцы крови на ватных дисках, волосы с фолликулами, ногти, слюна или сперма. Если по каким-либо причинам не удается получить указанные материалы, могут быть использованы другие биологические образцы.

Сбор образцов тканей для установления родства по требованию суда осуществляется в присутствии свидетелей согласно следующим нормативам:

• ст. 35 Федерального закона от 31 мая 2001 г. № 73-ФЗ "О государственной судебно-экспертной деятельности в Российской Федерации";
• п. 84.4 "Порядок организации и производства судебно-медицинских экспертиз в государственных судебно-экспертных учреждениях Российской Федерации" (Приказ Минздравсоцразвития РФ № 346н от 12.05.2010 г.).

В частном порядке (не для судебных нужд) образцы могут собираться заказчиками либо самостоятельно, либо в лаборатории.

Процесс исследования включает три этапа:

1. извлечение ДНК из биологического материала. Это критически важный шаг, для которого используются коммерческие наборы реактивов от ведущих зарубежных производителей, таких как Applied Biosystems (США), Promega (США), QIAGEN (Германия).
2. увеличение числа исследуемых локусов ДНК с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР).
3. анализ полиморфизмов длины фрагментов, полученных после ПЦР, с использованием капиллярного электрофореза и/или определение первичной последовательности нуклеотидов с помощью секвенирования.

Для повышения точности экспертизы важно учитывать степень родства, количество участников исследования и число анализируемых маркеров. Рекомендуется тестировать более двух человек, предположительно состоящих в родстве. Например, в экспертизе "внук-бабушка" вероятность положительного заключения превышает 90%, отрицательного — около 85%. В случае анализа "внук-бабушка-дедушка" вероятность положительного заключения возрастает до 99%, а отрицательного — до 100%.

Генетические маркеры, используемые для проведения экспертизы по установлению близкого родства, могут включать в себя:

• аутосомные локусы. Аутосомы — это парные хромосомы, которые идентичны как у мужчин, так и у женщин. Это все хромосомы, кроме половых (X- и Y-хромосом). Генетические маркеры на аутосомах (аутосомные локусы) чаще всего применяются в экспертизе для определения близкого родства. Для этих целей разработаны коммерческие наборы реактивов от ведущих мировых производителей.
• STR-локусы Y-хромосомы. Y-хромосома — половая хромосома, отвечающая за определение мужского пола. Она непарная, не рекомбинирует в мейозе и передается от отца к сыну в почти неизменном виде. Рекомендуется использовать 22 полиморфных локуса из базы данных Y-chromosome Haplotype Reference Database. Мы также подготовили статью, посвящённую анализу ДНК Y-хромосомы, озаглавленную «Генетическая экспертиза Y-хромосомы (тест семейной принадлежности)».
• STR-локусы X-хромосомы. X-хромосома — половая хромосома, отвечающая за определение женского пола. Женские клетки содержат две X-хромосомы, тогда как мужские — только одну. Поэтому в мужских клетках X-хромосома почти не рекомбинирует и передается детям без изменений. Компания QIAGEN предлагает набор Investigator Argus X-12 Kit для картирования локусов на X-хромосоме.
• нуклеотидный профиль митохондриальной ДНК (мтДНК). Мы также подготовили статью «Генетическая экспертиза митохондриальной ДНК (мтДНК)», которую можно изучить для получения дополнительной информации.

Во время экспертизы исследуются локусы ДНК, которые по мужской или женской линии передались от предполагаемого родственника. Для установления родства по отцовской линии используются либо аутосомные локусы, либо локусы на Y-хромосоме. Типирование по Y- и X-хромосомам применяется для установления отцовских родственных связей, например, "дед по отцу - внук", "дядя по отцу — племянник", "братья по отцу". По X-хромосоме определяются связи "бабушка по отцу — внучка", "тётя по отцу — племянница", "сестра по отцу". Для установления родства по материнской линии используют аутосомные локусы или анализируют профиль митохондриальной ДНК.

Для экспертизы необходимо предоставить образцы биологического материала от предполагаемой бабушки, дедушки, матери и сына/дочери.

Задача: установить родство между дедушкой/бабушкой по отцу и их внуком/внучкой.

Генетические маркеры: аутосомные маркеры, локусы Y- и X-хромосом.

Предположим, генотип сына (или дочери) по одному маркеру — DW, генотип матери — SW, предполагаемой бабушки — PR, предполагаемого дедушки — DA. Известно, что рассматриваемые дети являются биологическими детьми матери, что означает, что аллель W, присутствующая как у матери, так и у ребенка, была унаследована от матери. Аллель D была передана ребенку от биологического отца и, следовательно, должна присутствовать в генотипе его родителей. Генотип предполагаемого деда включает аллель D, что указывает на биологическое родство деда и ребенка.

Для проведения экспертизы понадобятся образцы биологического материала от предполагаемой бабушки, дедушки и сына или дочери.

Цель: установить родство дедушки или бабушки по материнской линии относительно внука или внучки.

Генетические маркеры: аутосомные маркеры и нуклеотидный профиль митохондриальной ДНК.

Предположим, генотип ребенка по одному из маркеров — DW, генотип отца — SW, генотип предполагаемой бабушки — PR, а предполагаемого дедушки — DA. Известно, что рассматриваемые дети являются родными детьми своего отца, что подразумевает, что аллель W была унаследована от отца. Аллель D была передана ребенку от матери, что означает, что она должна присутствовать в генотипе одного из ее родителей. Генотип предполагаемого деда содержит аллель D, что подтверждает биологическое родство дедушки по материнской линии с ребенком.

Для проведения анализа понадобятся образцы биологического материала от предполагаемой тети, дяди, отца, матери и племянника или племянницы.

Цель: определить родство тети или дяди по материнской линии по отношению к племяннику или племяннице.

Генетические маркеры: аутосомные маркеры и нуклеотидный профиль митохондриальной ДНК.

Предположим, генотип ребенка (сына или дочери) — DW, генотип предполагаемой тети — PA, предполагаемого дяди — PD, биологической матери — DR и биологического отца — SW. Известно, что рассматриваемые дети — родные дети своих родителей. Это подразумевает, что аллель W унаследована ребенком от отца, а аллель D — от матери. Аллель D должна быть в генотипе одного из ее родителей (дедушки или бабушки), а также может присутствовать у братьев и сестер (предполагаемого дяди и тети). В данном случае аллель D обнаружена в генотипе предполагаемого дяди. Исследование этой аллели указывает на биологическое родство дяди с племянником или племянницей. Анализ множества локусов дает возможность точно определить, действительно ли предполагаемый дядя или тетя являются родственниками.

Альтернативным и более надежным способом установления родства по материнской линии является исследование нуклеотидного профиля митохондриальной ДНК, который будет одинаковым у всех участников родства.

Для выполнения экспертизы потребуются образцы биологического материала от предполагаемой тети, дяди, отца и племянника или племянницы.

Цель: определить родство тети или дяди по линии отца относительно племянника или племянницы.

Генетические маркеры: аутосомные маркеры и локусы Y- и X-хромосом.

Y-хромосома присутствует исключительно у мужчин и передается только от отца к сыну. Таким образом, при исследовании генетических маркеров на Y-хромосоме, взятых у предполагаемого дяди и племянника, анализируется степень их сходства.